닉 번역과 프라이머 확장의 차이점 | Nick Translation vs Primer Extension

주요 차이점 - Nick translation vs Primer Extension Nick translation과 primer extension은 분자 생물학에서 수행되는 두 가지 중요한 기술이다. 닉 번역과 프라이머 신장의 주요 차이점은 닉 (nick) 번역 프로세스가 다른 하이브리드 화 기술을위한 표지 된 프로브를 생산한다는 것이다 (999). 프라이머 확장 방법은 혼합물로부터 특정 RNA 서열을 확인하고 mRNA의 발현에 대한 정보를 나타낸다. 두 기술 모두 매우 중요하며 분자 연구 실험실에서 일상적으로 수행됩니다.

목차 1. 개요 및 주요 차이점 2. 닉 번역이란 무엇입니까? 3. Primer Extension은 무엇입니까?

4. Side-Side Comparison - Nick Translation 대 ​​Primer Extension

5. 요약

닉 번역이란 무엇입니까? 닉 (Nick) 번역은 블 럿팅 (blotting), 현장 (in situ) 하이브리드 화, 형광

현장 (in situ)

하이브리드 화 등과 같은 다양한 분자 생물학적 기술을 위해 표지 된 프로브를 제조하는 데 사용되는 중요한 기술이다.

> in vitro

DNA 표지 방법. DNA 프로브는 특정 DNA 또는 RNA 서열을 확인하는 데 사용됩니다. 표지 된 프로브의 도움으로 핵산의 복잡한 혼합물로부터 특정 단편을 표시하거나 시각화 할 수 있습니다. 따라서, 표지 된 프로브는 다양한 기술을 사용하여 준비되어 다양한 기술에 사용됩니다. Nick translation은 DNA 분해 효소 1과 DNA 중합 효소 1 효소의 도움으로 표지 된 프로브를 생산하는 방법 중 하나입니다.

닉 번역 과정은 DNase 1 효소 활성으로 시작됩니다. DNase 1은 뉴클레오타이드 사이의 포스 포디 에스테르 결합을 절단함으로써 이중 가닥 DNA의 인산 골격에 닉스를 도입합니다. 일단 닉이 생성되면 뉴클레오타이드의 3 'OH 그룹이 유리되어 DNA 중합 효소 1 효소가 작용하게됩니다. DNA 중합 효소 1의 5 '에서 3'엑소 뉴 클레아 제 활성은 DNA 가닥의 3 '방향으로 닉으로부터 뉴클레오타이드를 제거한다. 동시에, DNA 중합 효소 1 효소의 중합 효소 활성이 작용하고 제거 된 뉴클레오타이드를 대체하기 위해 뉴클레오타이드를 첨가한다. 뉴클레오타이드가 표지 된 경우, 표지 된 뉴클레오타이드에 의해 대체가 일어나며, 식별을 위해 DNA를 표시 할 것이다. 이 새로 합성 된 표지 된 DNA는 Molecular Biology의 다양한 하이브 리다이 제이션 반응에서 프로브로 사용할 수 있습니다.

그림 01: 닉 번역 프로세스 Primer Extension이란 무엇입니까?프라이머 신장은 RNA 혼합물로부터 특정 RNA 서열을 찾고 mRNA 전 사체의 5 '말단을 찾는데 사용되는 기술이다. 그것은 또한 RNA와 표현의 구조를 연구하는 데 사용됩니다. 프라이머 신장 방법은 표지 된 프라이머 또는 표지 된 뉴클레오타이드로 수행한다. 표지 된 프라이머가 사용된다면, cDNA의 합성에 사용되는 뉴클레오티드를 표지 할 필요가 없다. 이 기술에는 몇 가지 단계가 있습니다. 그것은 샘플로부터 RNA 추출로 시작됩니다. 그런 다음 표지 된 올리고 뉴클레오타이드 프라이머를 특정 RNA 서열의 cDNA를 합성하기 위해 필요한 성분과 함께 혼합물에 첨가한다. 프라이머는 혼합물로부터 상보적인 서열과 어닐링한다. 프라이머 어닐링 된 서열을 주형으로 사용하여, 역전사 효소는 RNA 서열의 상보 적 DNA (cDNA)를 합성한다. 프라이머 어닐링 및 역전사는 특정 RNA 서열이 샘플에 존재할 때에 만 발생한다. 마지막으로, 변성 겔 전기 영동이 수행 될 때, RNA 서열의 크기가 결정될 수있다. 프라이머 연장 방법에 의해 mRNA (전사 개시 부위) 서열의 +1 염기를 용이하게 발견 할 수있다. 과량의 프라이머가 사용된다면 샘플에 존재하는 mRNA의 양은이 방법으로 정량화 될 수있다. <972> 그림 02: 입문서 확장 닉 번역과 입문서 확장의 차이점은 무엇입니까? - Nick Translation vs Primer Extension 닉 번역은 다양한 하이브 리다이 제이션 반응을위한 표지 된 DNA 프로브를 만드는 과정입니다. 프라이머 신장은 특정 RNA를 찾거나 유전자 발현을 연구하는 기술이다.

사용 된 효소 DNase 1 및 DNA 중합 효소 효소가 사용된다. 역전사 효소가 사용된다.

중요성

닉 번역은 특정 DNA 서열의 표시를 용이하게합니다. 프라이머 신장은 특정 mRNA 서열 크기 및 샘플에 존재하는 양의 검출을 가능하게한다. 요약 - Nick translation vs Primer Extension Nick translation은 DNase 1 및

대장균

DNA 중합 효소 1 효소의 활성을 바탕으로 표지 된 프로브를 합성하는 데 사용되는 방법입니다. 이는 상이한 하이브리드 화 기술 이전에 실험실에서 사용 된

in vitro

방법이다. 닉 번역 동안, DNA 중합 효소 1의 5'-3 '엑소 뉴 클레아 제 활성은 닉 (nick) 앞의 뉴클레오타이드를 제거하고 DNA 중합 효소 1의 중합 효소 활성은 제거 된 뉴클레오타이드를 닉 뒤에 표지 된 뉴클레오타이드로 대체한다. 프라이머 신장은 혼합물로부터 특정 RNA 전 사체를 검출하고 관심 RNA의 크기와 양을 정량화하는 데 사용되는 방법입니다. 이것이 닉 번역과 프라이머 확장의 차이입니다.

참고 문헌

1. 리드, 알렉스. "닉 번역. "스프링 어. N.p., n. 디. 편물. 2017 년 4 월 18 일

2. "프라이머 확장. "National Diagnostics. N.p., n. 디. 편물. 2017 년 4 월 19 일
3. Kuo, M. T. 및 W. Plunkett."metaphase 염색체의 닉 - 번역: 염색체의 핵산 분해 효소 - 과민성 영역의 시험 관내 표지. "미합중국 국립 과학 아카데미 회보. 미국 국립 중앙 도서관, 1985 년 2 월. 웹. 2017 년 4 월 19 일	4. Raymond et al. "microRNAs와 short-interfering RNA의 직접 모니터링을위한 간단하고 정량적인 primer-extension PCR 분석. "RNA. Copyright 2005 by RNA Society, 2005 년 11 월. 웹. 2017 년 4 월 19 일
이미지 예식:
1. "Primer Extension Assay"Jjnmmnjj - Commons Wikimedia를 통한 자체 연구 (CC BY-SA 3.0)	추천 신뢰도와 유효성의 차이 릴레이와 회로 차단기의 차이 : 릴레이 차단기와 차단기 종교와 정의의 차이