SDS Page와 Western Blot의 차이점 | SDS 페이지와 웨스턴 블랏

Anonim

주요 차이점 - SDS 페이지와 웨스턴 블랏

웨스턴 블 랏팅은 단백질 샘플에서 특정 단백질을 검출하는 기술입니다. 이 기술은 겔 전기 영동, 블 럿팅 및 하이브리드 화와 같은 몇 가지 주요 단계를 통해 수행됩니다. 도데 실 황산나트륨 폴리 아크릴 아미드 겔 전기 영동 (SDS Page)은 단백질을 크기 (분자량)에 따라 분리하는데 사용되는 일종의 겔 전기 영동 기술이다. Western blot은 SDS Page에서 같은 패턴의 단백질을 전달하는 데 사용되는 블로 팅 멤브레인의 특수 시트입니다. SDS Page와 Western blot 사이의 주요 차이점은 SDS Page는 혼합물 중 단백질 분리를 허용하고 웨스턴 블랏은 혼합물에서 특정 단백질의 검출 및 정량을 허용한다는 것입니다. 둘 다 단백질 분석 연구에 유용하다. 목차 1. 개요 및 주요 차이점

2. SDS 페이지 란 무엇입니까?

3. Western Blot이란 무엇입니까?

4. Side-Side 비교 - SDS 페이지 vs 웨스턴 블랏

5. 요약

SDS 페이지 란 무엇입니까?

SDS 페이지는 단백질 분리에 사용되는 겔 전기 영동 기술이다. 그것은 생화학, 유전학, 법의학 및 분자 생물학에서 일반적으로 사용됩니다. 샘플에서 단백질을 추출하면 SDS와 폴리 아크릴 아미드로 만든 젤에서 단백질을 추출합니다. SDS는 단백질을 선형화하고 분자량에 비례하여 선형화 된 단백질에 음전하를 부여하는 음이온 성 세제입니다. 폴리 아크릴 아미드는 겔의 고체 지지체가됩니다. 음으로 하전 된 변성 된 단백질은 겔을 통해 장치의 양단쪽으로 이동한다. 단백질의 크기에 따라 이동 속도는 단백질마다 다르며 분리가 발생합니다. 따라서 SDS 페이지는 크기에 따라 개별 단백질을 분리하는 데 유용합니다.

단백질 분획을위한 폴리 아크릴 아미드 겔의 제조는 SDS 페이지에서 중요한 단계입니다. 폴리 아크릴 아마이드의 정확한 농도와 사용 된 가교 결합제의 유형은 젤의 물리적 특성에 강하게 영향을 미치기 때문에 서로 다른 단백질을 실제로 분리 할 수 ​​있습니다. 효과적인 분리를 위해서는 겔의 기공 크기를 적절하게 관리해야합니다. 그러나 SDS Page는 고해상도 단백질 분리 기술로 간주됩니다.

SDS 페이지 기술은 단백질 분석에 큰 한계가 있습니다. SDS는 분리 전에 단백질을 변성시키기 때문에 효소 활성, 단백질 결합 상호 작용, 단백질 보조 인자 등을 검출 할 수 없다.

그림 01: SDS 페이지

Western blot이란 무엇인가? 웨스턴 블 랏팅 기술은 단백질 혼합물로부터 특정 단백질을 검출하고 단백질의 양 및 분자량을 측정 할 수있게한다. 웨스턴 블랏은 SDS- 폴리 아크릴 아미드 겔에서 단백질 패턴의 거울상을 얻기 위해 블 럿팅 과정에서 사용되는 막입니다. 웨스턴 블 랏팅에 사용되는 멤브레인은 주로 니트로 셀룰로오스 또는 폴리 비닐 리덴 디 플루오 라이드 (PVDF)로 구성됩니다. 전달 된 단백질이있는 멤브레인을 사용하여 원하는 단백질을 확인할 수 있습니다. 하이브 리다이 제이션에 의해 원하는 단백질 검출을위한 고품질의 항체가 필요합니다. 항체는 특정 항원에 결합하여 단백질 인 원하는 항원의 존재를 나타냅니다. SDS 폴리 아크릴 아미드 겔로부터 웨스턴 블랏으로 단백질을 전달하는 것은 일렉트로 블로 팅 (electroblotting)에 의해 수행된다. 단백질이 겔에서 전기 영동되어 니트로 셀룰로오스 멤브레인 (웨스턴 블랏)으로 전달되도록하는 효과적이고 빠른 방법입니다. <972> 그림 02: Western Blot

SDS Page와 Western Blot의 차이점은 무엇입니까?

- SDS 페이지와 웨스턴 블랏

SDS 페이지는 겔 전기 영동 기술입니다.

웨스턴 블랏은 혼합물에서 특정 단백질을 검출하기 위해 막에서 수행되는 기술이다.

Use

SDS 페이지는 크기에 따라 단백질을 분리합니다.

Western blot은 SDS page gel에서 단백질의 패턴을 변화시키지 않고 단백질을 옮기고 특정 항체와의 hybridization을 가능하게합니다. 단점

단백질 변성, 고비용 및 신경독 화학 물질의 존재는이 기술의 단점이다. 이 기법은 시간 소모적이며 경험이 풍부한 개인적이고 특정한 통제 된 조건을 요구한다.

Summary - SDS Page vs Western Blot

SDS 페이지와 웨스턴 블랏은 단백질 분석과 관련된 두 가지 방법입니다. SDS Page는 분자량에 따라 단백질을 겔상에서 쉽게 분리 할 수 ​​있습니다. Western blot은 특정 항체와의 혼성화를 통해 특정 단백질의 존재와 양을 확인하는 데 도움이됩니다. 이것이 SDS Page와 Western blot 사이의 차이점입니다. 참고 문헌:
1. Blancher, C., A. Jones. "SDS-PAGE와 Western Blotting Techniques. "분자 의학의 방법. 미국 국립 중앙 도서관, n. 디. 편물. 2017 년 3 월 27 일
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1. "SDS-PAGE Electrophoresis"Commons Wikimedia를 통한 영어 위키 피 디아 (CC By 3.0)의 Bensaccount 2. "Western blot 114A"Amanthabagdon 저서 - Commons Wikimedia를 통해 자신의 저작물 (Public Domain)