남, 북부와 웨스턴 블 롯팅의 차이 | Southern vs Northern vs Western blotting

주요 차이점 - 북부 대 남부 대 웨스턴 블 랏팅

DNA, RNA 및 단백질의 특정 서열 검색은 다양한 분자 생물학 연구의 유형. 겔 전기 영동은 크기에 따라 DNA, RNA 및 단백질을 분리하는 기술입니다. 겔 프로파일로부터 특정 DNA 서열, RNA 서열 또는 단백질은 표지 된 프로브를 이용한 블 럿팅 (blotting) 및 하이브리드 화 (hybridization)라는 특별한 기술로 검출됩니다. 남부, 북부 및 서부의 세 가지 유형의 블로 팅 방법이 있습니다. 북부 남부와 서부의 블로 팅 (western blotting)의 주요 차이점은 표본에서 검출하는 분자의 유형에 달려있다. 서던 블 랏팅 (Southern blotting)은 DNA 샘플로부터 특정 DNA 서열을 검출하는 방법이다. 노던 블 랏팅은 RNA 샘플로부터 특정 RNA 서열을 검출하는 기술입니다. 웨스턴 블 랏팅 (Western blotting)은 단백질 샘플에서 특정 단백질을 검출하는 방법입니다.

목차

1. 개요 및 주요 차이점

2. Southern Blotting이란 무엇입니까?

3. 노던 블 랏팅이란 무엇입니까?

4. 웨스턴 블 랏팅이란 무엇입니까?

5. 나란히 비교 - 북부 vs 남부 대 웨스턴 블 랏팅

6. 요약

Southern Blotting이란 무엇인가? Southern blotting technique은 1975 년 DNA 샘플로부터 특정 DNA 서열을 동정하기 위해 E. M. Southern에 의해 개발되었다. 이것은 분자 생물학에서 처음 도입 된 기술입니다. DNA의 특정 유전자, DNA의 특정 단편 등을 검출 할 수있었습니다. 남부 블 롯팅 기술에 관련된 몇 가지 단계가 있습니다. 그들은 다음과 같습니다.

DNA를 샘플로부터 분리하고 제한 효소로 절단 하였다. 소화 된 샘플은 아가 로스 겔 전기 영동에 의해 분리된다. 겔 중의 DNA 단편은 알칼리성 용액의 사용에 의해 단일 가닥으로 변성된다. 단일 가닥 DNA를 모세관 이동에 의해 니트로 셀룰로오스 필터 막으로 옮긴다. 전사 된 DNA는 막 상에 영구히 고정된다.

멤브레인상의 고정 된 DNA는 표지 된 프로브와 혼성화된다. 결합되지 않은 DNA는 세정에 의해 막으로부터 씻겨 나간다. X- 레이 필름을 막에 노출시키고 오토 방사 사진을 준비한다.

1. 서던 블 랏팅은 분자 생물학의 다양한 측면에 적용됩니다.RFLP지도 작성, 법의학 연구, 유전자 발현의 DNA 메틸화, 유전 질환에서의 돌연변이 유전자 검출, DNA 지문 인식 등에 유용합니다. <그림 9-9> 그림 11: Southern Blotting Technique
2. Northern Blotting이란? 노던 블 롯팅은 특정 RNA 서열 또는 mRNA 서열을 샘플로부터 유전자 발현을 조사하기 위해 고안된 방법이다. 이 기술은 1979 년 Alwine, Kemp 및 Stark에 의해 개발되었습니다. 이것은 여러 단계로 인해 남서 및 서양 블 랏팅 기술과 다릅니다. 그러나이 기술은 겔 전기 영동, 블 럿팅, 특정 표지 된 프로브 및 검출과의 혼성화를 통해 수행됩니다. 노던 블 랏팅 기술은 다음과 같이 수행된다. RNA는 샘플로부터 추출되고 겔 전기 영동에 의해 분리된다. RNA를 겔로부터 블 럿팅 막으로 옮기고 고정시켰다. 막은 cDNA 또는 RNA로부터 제조 된 표지 된 프로브로 처리된다 (프로브는 샘플 내의 특정 서열에 상보 적이다). 프로브는 막과 함께 항온 처리되어 특정 서열과 결합한다.
3. 언 바운드 프로브가 씻겨 나옵니다.
4. 하이브 리다이 제이션 된 단편은 오토 방사선 사진으로 검출됩니다. 노던 블 랏팅은 혼성화 mRNA의 검출 및 정량화, RNA 분해 연구, RNA 반감기 평가, RNA 스 플라이 싱 검출, 유전자 발현 연구 등의 중요한 도구이다.도 02: 노던 블 랏팅
5. 웨스턴 블 럿팅이란 무엇입니까?
6. 웨스턴 블 랏팅 (Western blotting)은 표지 된 항체를 사용하여 단백질 혼합물로부터 특정 단백질을 검출하는 방법이다. 따라서 Western blot은
7. immunoblot
8. 라고도합니다. 이 기술은 1979 년 Towbin

et al

에 의해 소개되었으며 단백질 분석을 위해 실험실에서 일상적으로 수행됩니다. 단계는 다음과 같습니다.

단백질은 시료에서 추출됩니다.

단백질은 폴리 아크릴 아미드 겔 전기 영동을 사용하여 크기별로 분리됩니다. 분리 된 분자는 전기 천공 법으로 PVDF 멤브레인 또는 니트로 셀룰로스 멤브레인으로 옮깁니다.

멤브레인은 항체 전달 된 단백질은 1 차 항체 (효소로 표지 된 항체)와 결합한다. 막을 세척하여 비특이적으로 결합 된 1 차 항체를 제거한다. 결합 된 항체는 기질을 첨가하고 형성된 착색 된 침전물을 검출함으로써 검출된다.999 웨스턴 블 랏팅은 인간 혈청 샘플에서 항 -HIV 항체의 검출에 유용하다. 웨스턴 블랏은 또한 B 형 간염 감염과 광우병에 대한 확진 검사를위한 확인 시험으로 사용될 수 있습니다.

1. 그림 03: 웨스턴 블 랏팅
2. 북부 남부와 웨스턴 블 롯팅의 차이점은 무엇입니까?
3. - Northern vs Southern vs Western blotting
4. Northern blotting
5. Northern blotting은 RNA 샘플로부터 특정 RNA 서열을 검출한다. Southern blotting
6. Southern blotting은 DNA 샘플로부터 특정 DNA 서열을 검출한다.웨스턴 블 랏팅 (Western Blotting)

웨스턴 블 랏팅 (Western blotting)은 단백질 샘플로부터 특정 단백질을 검출한다.

젤 유형

노던 블 랏팅

아가로 오스 / 포름 알데히드 겔을 사용합니다. Southern Blotting 아가로 오스 겔을 사용합니다. Western Blotting 폴리 아크릴 아미드 젤을 사용합니다.

1. 블 럿팅 방법
2. 노던 블 랏팅
3. 이것은 모세관 이동이다.
4. Southern Blotting
5. 모세관 이전.
6. 웨스턴 블 랏팅
7. 이것은 전기 전달입니다.

사용 된 프로브

노던 블 랏팅

방사성 또는 비 방사성으로 표지 된 cDNA 또는 RNA 프로브.

Southern Blotting

DNA 프로브는 방사성 또는 비 방사성으로 라벨링된다.
웨스턴 블 랏팅 (Western blotting)
1 차 항체가 프로브로 사용된다.	검출 시스템
노던 블 랏팅	이것은 방사능 사진이나 빛이나 색의 변화를 감지하여 수행됩니다.
서던 블 랏팅 (Southern Blotting)	이것은 방사선이나 색 변화를 감지하는 오토 라디오 그래피를 사용하여 이루어진다.
웨스턴 블 랏팅 (Western Blotting)
이것은 빛 또는 변색의 검출을 이용하여 수행된다.	Summary - Northern vs Southern vs Western blotting
블 럿팅은 표본으로부터 특정 DNA, RNA 또는 단백질을 동정하기 위해 개발 된 특별한 기술이다. 특정 유형의 분자를 검출하기 위해 북부, 남부 및 서부의 세 가지 분리 된 흡착 절차가 있습니다. 노던 블 랏팅 기술은 RNA 혼합물로부터 특정 RNA 서열을 검출하도록 고안되었습니다. Southern blotting 기술은 DNA 샘플로부터 특정 DNA 서열의 검출을 가능하게하고, 단백질 혼합물로부터 특정 단백질을 확인하기 위해 Western blotting 기술이 개발된다.	참고 문헌
1. 기븐스, 제이. "Western Blot: 단백질 전달 개요. "북미 의학 의학 저널. Medknow Publications & Media Pvt Ltd, 2014 년 3 월. 웹. 2017 년 3 월 27 일	2. 브라운, T. "서던 블로 팅. "면역학의 현재 프로토콜. 미국 국립 중앙 도서관, 2001 년 5 월. 웹. 2017 년 3 월 27 일
3. 그는 Shan L. "Northern blot. "효소학의 방법. 미국 국립 중앙 도서관, 2013. 웹. 2017 년 3 월 27 일
이미지 예식:	1. "Northern Blot Scheme"by RNA405 - Commons Wikimedia를 통한 자체 저작물 (공개 도메인)
2. "Western blot 114A"Amanthabagdon 저서 - Commons Wikimedia를 통해 자신의 저작물 (Public Domain)	추천 포괄 및 충돌 간 차이 : 종합 대 충돌 컴퓨터 과학과 정보 기술의 차이 강박 및 충동의 차이 | 강박 대 충동 적